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Cambios en la expresión genética y enzimática causados por estrés salino en plantas de arabidopsis thaliana tratadas con oligosacáridos de xiloglucanos

At present, there is a persistent concern about the use of pesticides and agrochemicals in agricultural activities, whose toxic effects are a source of apprehension for the population worldwide. Therefore, a progressive increase in the use of biostimulants, among them the oligosaccharides of xyloglu...

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Detalles Bibliográficos
Autor Principal: Obando Rojas, Mayra Cecilia
Otros Autores: González Pérez, Lien
Formato: Tesis de Pregrado
Publicado: Quito: Universidad de las Américas, 2017. 2017
Materias:
AGRICULTURA
PESTICIDAS
AGROQUÍMICOS
Acceso en línea:http://dspace.udla.edu.ec/handle/33000/7443
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Obando Rojas, Mayra Cecilia
Cambios en la expresión genética y enzimática causados por estrés salino en plantas de arabidopsis thaliana tratadas con oligosacáridos de xiloglucanos
description At present, there is a persistent concern about the use of pesticides and agrochemicals in agricultural activities, whose toxic effects are a source of apprehension for the population worldwide. Therefore, a progressive increase in the use of biostimulants, among them the oligosaccharides of xyloglucans. These are involved in the stimulation of natural processes that benefit the development of plants and generate responses under conditions of biotic and / or abiotic stress in plants. This Project evaluates the changes of catalase (CAT) gene expression and relative presence of the CAT enzyme induced by xyloglucan oligosaccharide (XGO) treatment under normal conditions and saline stress in Arabidopsis thaliana plants planted in vitro. Plants of A. thaliana were planted in liquid MS medium, the same ones that were grown for a period of 15 days, samples were collected pertaining to T0 (negative control of time 0 before induction). Subsequently an induction was performed in culture media, adding 100 mM NaCl ± 0.1 mg.L-1 of XGO and samples were taken at 24 and 72 hours post-induction. To validate the changes in gene expression, the relative expression of the cat gene was analyzed by real-time PCR. The relative presence of the enzyme Catalase was determined by Western blotting and enzyme activity was determined by spectrophotometry. We demonstrated that levels of gene expression of the cat gene increased significantly, in the presence of XGO and NaCl at 24 hours post-induction. As well as, the relative presence of the CAT enzyme was increased in the presence of XGO ± NaCl, at 72 hours post induction. Finally, an increase in the pattern of CAT activity was observed at 24 and 72 hours post induction, with and without saline stress. The results obtained in this work suggest that xyloglucan oligosaccharides are involved in the stimulation and activation of different defense mechanisms in plants against oxidative stress, which allow them to tolerate unfavorable conditions of saline stress.
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Obando Rojas, Mayra Cecilia
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publisher Quito: Universidad de las Américas, 2017.
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spelling ir-:33000-74432019-03-19T13:48:56Z Cambios en la expresión genética y enzimática causados por estrés salino en plantas de arabidopsis thaliana tratadas con oligosacáridos de xiloglucanos Obando Rojas, Mayra Cecilia González Pérez, Lien AGRICULTURA PESTICIDAS AGROQUÍMICOS At present, there is a persistent concern about the use of pesticides and agrochemicals in agricultural activities, whose toxic effects are a source of apprehension for the population worldwide. Therefore, a progressive increase in the use of biostimulants, among them the oligosaccharides of xyloglucans. These are involved in the stimulation of natural processes that benefit the development of plants and generate responses under conditions of biotic and / or abiotic stress in plants. This Project evaluates the changes of catalase (CAT) gene expression and relative presence of the CAT enzyme induced by xyloglucan oligosaccharide (XGO) treatment under normal conditions and saline stress in Arabidopsis thaliana plants planted in vitro. Plants of A. thaliana were planted in liquid MS medium, the same ones that were grown for a period of 15 days, samples were collected pertaining to T0 (negative control of time 0 before induction). Subsequently an induction was performed in culture media, adding 100 mM NaCl ± 0.1 mg.L-1 of XGO and samples were taken at 24 and 72 hours post-induction. To validate the changes in gene expression, the relative expression of the cat gene was analyzed by real-time PCR. The relative presence of the enzyme Catalase was determined by Western blotting and enzyme activity was determined by spectrophotometry. We demonstrated that levels of gene expression of the cat gene increased significantly, in the presence of XGO and NaCl at 24 hours post-induction. As well as, the relative presence of the CAT enzyme was increased in the presence of XGO ± NaCl, at 72 hours post induction. Finally, an increase in the pattern of CAT activity was observed at 24 and 72 hours post induction, with and without saline stress. The results obtained in this work suggest that xyloglucan oligosaccharides are involved in the stimulation and activation of different defense mechanisms in plants against oxidative stress, which allow them to tolerate unfavorable conditions of saline stress. En la actualidad, existe una preocupación persistente por el uso de los pesticidas y agroquímicos en las actividades agrícolas, cuyos efectos tóxicos son fuente de aprehensión para la población a nivel mundial. Por ello, se presenta un incremento progresivo de la utilización de bioestimulantes, entre ellos los oligosacáridos de xiloglucanos. Estos se involucran en la estimulación de los procesos naturales que benefician el desarrollo de las plantas y generan respuestas bajo condiciones de estrés biótico y/o abiótico. En el presente trabajo experimental se analizó los cambios de la expresión génica y enzimática de catalasa (CAT) inducidos por el tratamiento con oligosacáridos de xiloglucanos (XGO), en condiciones normales y de estrés salino, en plantas de Arabidopsis thaliana sembradas in vitro. Se sembró plantas de A. thaliana en medio MS líquido, las mismas que crecieron por un periodo de 15 días, se realizó la recolección de muestras pertenecientes al T0 (Control negativo de tiempo 0 antes de la inducción). Posteriormente se realizó una inducción en los medios de cultivo, adicionando 100 mM de NaCl ± 0.1 mg.L-1 de XGO y se tomaron muestras a las 24 y 72 horas posteriores a la inducción. Para validar los cambios en la expresión génica se analizó la expresión relativa del gen cat mediante PCR en tiempo real. La presencia relativa de la enzima Catalasa se determinó por Western blot y la actividad de la enzima mediante espectrofotometría. Se evidenció que los niveles de expresión génica del gen cat aumentaron significativamente, en presencia de XGO y NaCl a las 24 horas después de la inducción. Así como también, la presencia relativa de la enzima CAT se incrementó en presencia de XGO ± NaCl, a las 72 horas posteriores a la inducción. Finalmente, se observó un aumento en el patrón de la actividad de CAT a las 24 y 72 horas, con y sin estrés salino. Los resultados obtenidos en esta investigación, sugieren que los oligosacáridos de xiloglucanos se involucran en la estimulación y activación de mecanismos de defensa en las plantas frente al estrés oxidativo, que les permiten tolerar las condiciones desfavorables del estrés salino. 2017-09-22T16:03:56Z 2017-09-22T16:03:56Z 2017 bachelorThesis Obando Rojas, M. C. (2017). Cambios en la expresión genética y enzimática causados por estrés salino en plantas de arabidopsis thaliana tratadas con oligosacáridos de xiloglucanos (Tesis de pregrado). Universidad de las Américas, Quito. UDLA-EC-TIB-2017-14 http://dspace.udla.edu.ec/handle/33000/7443 spa openAccess Atribución-SinDerivadas 3.0 Ecuador http://creativecommons.org/licenses/by-nd/3.0/ec/ 100 p. application/pdf Quito: Universidad de las Américas, 2017.
score 11,871979

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